In situ hibridizáció különböző módszereinek adaptálása és továbbfejlesztése búza genetikai alapanyagok elemzésére
Title in English
Adaptation and development of different methods of in situ hybridization for the analysis of wheat genetic stocks
Panel
Plant and animal breeding
Department or equivalent
Department of Genetic Resources (Centre for Agricultural Research)
Participants
Nagy, Ervin
Starting date
2002-01-01
Closing date
2005-12-31
Funding (in million HUF)
4.700
FTE (full time equivalent)
0.00
state
closed project
Final report
Results in Hungarian
Pályázatunk során a legfontosabb célkitűzésünk volt olyan in situ hibridizációs módszerek adaptálása és továbbfejlesztése laboratóriumunkban, amelyek alkalmasak transzgének kimutatására is, valamint a csoportunkban korábban faj- és nemzetségkeresztezéssel létrehozott közeli rokonságban lévő hibridekben és azok származékaiban az idegen fajból származó kromoszómák kimutatása. A fiber-FISH technikát sikerrel adaptáltuk a molekuláris citogenetika csoportban. A kihúzott DNS fonalakat előállítottuk izolált sejtmagokból ill. flow-sorted kromoszómákból. Megkezdtük a különböző technikákkal elkészített preparátumok és a módszer tesztelését, egymástól eltérő, fluorokrómokkal jelölt próbát használtunk, amely a transzgént különböző formában tartalmazta.
Sikerrel oldottuk meg a búza-Ae. biuncialis hibridek származékaiban az Ae. biuncialis kromoszómák kimutatását genomikus in situ hibridizációval (GISH). Bevezettük a PRINS in situ hibridizációs technikát (primed in situ labeling). PCR alkalmazásával előállított GAA trinukleotid szekvenciák segítségével végeztük el az Ae. biuncialis kromoszómák azonosítását a búza genomjában.
Results in English
The main aim of the project was to adapt and improve in situ hybridisation methods that were suitable for the detection of transgenes, and to detect chromosomes from alien species in closely related hybrids previously developed by the team from interspecific and intergeneric crosses, and in their progeny. The fibre-FISH technique was successfully adapted by the molecular cytogenetics team. Extended DNA fibres were produced from isolated cell nuclei or from flow-sorted chromosomes. Work has begun on the testing of the method and of preparations made using various techniques using various probes labelled with fluorochromes and containing the transgene in various forms.
The Ae. biuncialis chromosomes in derivatives of wheat–Ae. biuncialis hybrids were successfully detected using genomic in situ hybridisation (GISH). The PRINS in situ hybridisation technique (primed in situ labelling) was also introduced. With the aid of GAA trinucleotide sequences developed using PCR, the Ae. biuncialis chromosomes in the wheat genome have been analyzed.
Molnár-Láng M., Linc G., Nagy E.D., SChneider A., Molnár I.: Molecular cytogenetic analysis of wheat-alien hybrids and derivatives., Acta Agronomica Hungarica. Vol. 50 (3): 303-311, 2002
Schneider A., Linc G., Molnár I., Molnár-Láng M.: Molecular cytogenetic characterization of Aegilops biuncialis and its use for identification of five derived wheat/Ae. biuncialis disomic addition lines, Genome 48: 1070-1082, 2005
Schneider, A., Linc, G., Molnár-Láng M.: Fluorescence in situ hybridization (FISH) polymorphism with two repetitive DNA clones (pAs1, pSc119.2) in different wheat cultivars., Plant Breeding. 122: 396-400, 2003
Linc G., Schneider A., Molnár-Láng M.: FISH hybridization pattern of tetraploid Aegilops biuncialis and its use for the identification of new wheat-Ae. biuncialis addition lines., International Polyploid Conference, 27-30 April 2003. Linnean Society and Royal Botanic Gardens, Kew, London. pp.25., 2004
Linc G., Schneider A., Hoffmann B., Lángné Molnár M.: Aegilops biuncialis Vis. FISH kariotípusának kidolgozása és felhasználása genetikai alapanyagok azonosítására., IX. Növénynemesítési Tudományos Napok, Budapest, pp111, 2003
Linc G., Schneider A., Molnár I., Molnár-Láng M.: Production and molecular cytogenetic identificaion of Triticum aestivum-Aegilops biuncialis disomic additions., In Proc. 10th International Wheat Genetics Symposium (eds. N.E.Pogna, M.Romano, E.A.Pogna, G., Galterio), 1-6 September 2003. Paestum, Italy. Istituto Sperimentale per la Cerealicoltura, Roma, Italy. pp 604-606, 2003
Molnár I., Schneider A. Molnár-Láng M.: Identification of, Cereal Res. Comm. submitted, 2005
Events of the project
2009-04-03 09:19:49
Kutatóhely váltás
A kutatás helye megváltozott. Korábbi kutatóhely: Növényi Sejtbiológiai Osztály (MTA Mezőgazdasági Kutatóintézete), Új kutatóhely: Génmegőrzési és Organikus Nemesítési Osztály (MTA Mezőgazdasági Kutatóintézete).
