Izomdystrophiák differenciál-diagnosztikai vizsgálata molekuláris genetikai, valamint immunhisztokémiai és immunoblot analízisek segítségével  részletek

súgó  nyomtatás 
vissza »
 

Projekt adatai

  
azonosító
38049
típus K
Vezető kutató Karcagi Veronika
magyar cím Izomdystrophiák differenciál-diagnosztikai vizsgálata molekuláris genetikai, valamint immunhisztokémiai és immunoblot analízisek segítségével
Angol cím Differential diagnostic study of muscle dystrophies by molecular genetic, immunohystochemical and Western-blot analyses
zsűri Élettan, Kórélettan, Gyógyszertan és Endokrinológia
Kutatóhely Országos Környezetegészségügyi intézet (Országos Tisztifőorvosi Hivatal)
résztvevők Balog Judit
Hajdu Krisztina
Herczegfalvi Ágnes
Kékesdyné dr. Siska Éva
Pikó Henriett
Tímár László
Tóth András
projekt kezdete 2002-01-01
projekt vége 2005-12-31
aktuális összeg (MFt) 7.520
FTE (kutatóév egyenérték) 0.00
állapot lezárult projekt





 

Zárójelentés

  
kutatási eredmények (magyarul)
A DMD/BMD betegségben célul tűzték ki a cDNS próbák alkalmazását a hordozósági státusz vizsgálatára és a deléciók pontos méretének meghatározására. Az újonnan bevezetett MLPA módszer segítségével a teljes dystrophin gén feltérképezésére, bizonyos pont mutációk kiszűrésére, a deléciók és duplikációk pontos analízisére, továbbá a hordozóság gyors szűrésére is vállalkozhattak. Összesen 120 beteg és 89 női hozzátartozó molekuláris analízisét végezték el a pályázat támogatásával. Az FSHD betegségben a komplex genetikai háttér miatt szükséges a molekuláris diagnosztikus kritériumok finomítása. A betegség hátterében álló epigenetikus változások kulcsfontosságúak lehetnek fenotípus kialakulásában. A betegség pathomechanizmusában a D4Z4 szekvenciáktól proximálisan elhelyezkedő gének megváltozott transzkripciójának van szerepe, amelynek vizsgálatára metilációs analízist alkalmaztak. A klinikai diagnózis megerősítésére összesen 90 beteg és 46 tünetmentes hozzátartozó DNS mintáját analizálták. Az LGMD betegségcsoport a betegek differenciál-diagnosztikája jelenleg csak specifikus fehérjedetektálási módszerekkel lehetségesek. Ezeket a módszereket alkalmazták azokban az esetekben, ahol az FSHD és DMD/BMD molekuláris genetikai vizsgálata negatív volt. A vizsgálati periódusban 122 beteg izombiopsziás mintája érkezett, ebből 56 esetben immunhisztokémiai, míg 20 esetben kiegészítő western blot analízis történt. További, DNS szintű analízisek 14 esetben azonosították a patogén mutációt.
kutatási eredmények (angolul)
The first aim of the study was to introduce cDNA probes for the analysis of DMD/BMD in order to detect carrier status and exact deletion borders. Additionally, the new MLPA technique was first introduced by us in Hungary and enabled the detection of the entire dystrophin gene with highlights on specific pointmutations, exact analysis of the deletions and duplications and moreover, on efficient screening of the carrier status. During the project, 120 affected persons and 89 female relatives were screened. In case of the FSHD molecular genetic criteria have to be improved because of the complexity of the disorder. Epigenetic influences may play a crutial role in modulating phenotype. Altered transcriptional activities of neighbouring genes proximal to the D4Z4 sequences have a key place in the pathomechanism, therefore, this effect was studied by methylation analysis. For confirmation of the clinical diagnosis 90 patients and 46 asymptomatic family members were genetically nalysed. The differential diagnosis of the heterogenous group of LGMD requires at first the specific analysis of the dystrophin-associated glycoproteins. This was used in the case of patients where the establishment of the genetic diagnosis of DMD/BMD or FSHD failed. Muscle biopsies and blood samples of 122 patients were sent to the laboratory; in total 56 immunohistochemical and 20 Western blot analyses have been performed. In 14 patients the exact pathogenic mutation has been identified by DNA sequencing.
a zárójelentés teljes szövege http://real.mtak.hu/459/
döntés eredménye
igen





 

Közleményjegyzék

  
Horváth R., Walter M.C., Lochmüller H., Hübner A., Karcagi V., Pikó H., Tímár L., Komoly S.: Limb girdle izomdystrophiát okozó calpain defektus egy magyar családban, Clin Neurosci/Ideggy Szle.58(1-2):52-58, 2005
Pikó H., Nagy I., Herczegfalvi Á., Endreffy E., Karcagi V.: Hordozóság szűrése Duchenne/Becker izomdystrophiában, Magyar Higiénikusok Társaságának Konferenciája, 2002
Herczegfalvi Á., Pikó H., Bán Z., Karcagi V.: Facioscapulohumeralis izomdystrophia (FSHD) diagnosztizálása egypetéjű ikrekben, Gyermekgyógyászat 56 (1):26-32, 2005
Luba Kalaydjieva, Hanns Lochmüller, Ivailo Tournev, Frank Baas, Judit Beres, Jaume Colomer, Velina Guergueltcheva Ralf Herrmann, Veronika Karcagi, Rosalind King, Toshiyuki Miyata, Andrea Müllner-Eiden: 125th ENMC International Workshop: Neuromuscular Disorders in the Roma (Gypsy) Population,, Neuromuscular Disorders 15: 65-71, 2005
J. Kirschner, Y. Zan, R. Horvath, A. Herczegfalvi, V. Karcagi, D. Sudano, BGH Schoser, D. Carey, H. Lochmüller, CG. Böhnermann: Congenital cutis laxa with myopathy: a new phenotype in two siblings, Neuromuscular Disorders, 2004, 14, 8-9, p. 451-633, 2004
V. Karcagi, R. Horváth, C. R. Müller, A. Hübner, L. Tímár, H. Pikó, S. Komoly, H. Lochmüller: Molecular detection of the calpain defect causing limb-girdle muscular dystrophy type 2A in a Hungarian family, European Journal of Human Genetics, 2004, Vol. 12, Suppl. 1, p. 215, 2004
J. Balog, H. Pikó, Á. Herczegfalvi, P. Mayer, Z. Bán, V. Karcagi: Overview of the molecular diagnosis of facioscapulohumeral muscular dystrophy (FSHD) in Hungarian patients, European Journal of Human Genetics, 2004, Vol. 12, Suppl. 1, p. 212, 2004
Balog J., Pikó H., Herczegfalvi Á., Mayer P., Bán Z., Perényi J., Mechler F., Horváth R., Molnár MJ., Karcagi V.: A facioscapulohumeralis izomdystrophia molekuláris diagnosztikájának hazai eredményei, Magyar Neurogenetikai Társaság IV. konferenciája 2004. június 3-4., Dobogókő, 2004
Balog J., Tímár L., Herczegfalvi Á., Mayer P., Bán Z., Karcagi V.: A facioscapulohumeralis izomdystrophia molekuláris genetikai vizsgálata, geno- és fenotípus összefüggések, Gyermekneurológiai konferencia, Szombathely, 2004. május 6-8., 2004
Pikó H., Endreffy E., Herczegfalvi Á.,Bán Z., Karcagi V.: A Duchenne/Becker izomdystrophia genetikai diagnosztizálásának, valamint hordozóság szűrésének hazai tapasztalatai, MTA-SZAB Tudományos előadássorozat, Szeged, 2004 június 22., 2004
H. Pikó, J. Balog, Z. Bán, P. Mayer, R. Horváth, V. Karcagi: Prenatal diagnosis in three Hungarian families affected by facoscapulohumeral dystrophy, 12th International Conference on Prenatal Diagnosis and Therapy, 2004
Herczegfelvi Á., Pikó H., Karcagi V.: A Duchenne/Becker izomdystrophia genetikai diagnosztizálása és terápiás lehetőségei, Magyar Gyermekorvosok Társasága 2004. évi naggyűlése Debrecen, 2004 okt. 7-9., 2004
Balog J., Pikó H., Herczegfalvi Á., Mayer P., Karcagi V.: Molecular diagnosis in Hungarian facioscapular muscular dystrophy (FSHD) patients, Nanotechnology in Biomedicine konferencia 2004 okt. 8-9, MTA, Budapest, 2004
Balog Judit, Pikó Henriett, Karcagi Veronika: DNS metiláció szerepe öröklődő betegségek kialakulásában, Magyar Humángenetikusok V. Munkakonferenciája, Szeged 2004. november 11-13., 2004
Pikó H., Endreffy E., Herczegfalvi Á., Bán Z., Karcagi V: A Duchenne/Becker izomdystrophia genetikai diagnosztizálásának, valamint hordozóság szűrésének hazai tapasztalatai, Magyar Neurogenetikai Társaság IV. konferenciája 2004. június 3-4., Dobogókő, 2004
Pikó H, Nagy B., Balog J., Karcagi V.: Improved molecular diagnosis of dystrophin gene mutations: Comparison of multiplex PCR, cDNA probe and multiplex ligation-dependent probe amplification methods in Hungarian DMD/BMD families, FEBS, Budapest, 2005
Juliane S Müller, Henriett Pikó, Benedikt GH Schoser, Beate Schlotter-Weigel, Peter Reilich, Stefanie Gürster, Christine Born, Veronika Karcagi, Dieter Pongratz, Hanns Lochmüller, Maggie C. Walter: Novel splice site mutation in the caveolin-3 gene leading to autosomal recessive limb girdle muscular dystrophy, Neuromuscular Disorders, in press, 2005
C. Jaeger, D. Augius-Galea, C. Angelini, F. Bignami, O. Cohen, J.H. Di Donato, C. Guitard-Arneau, M. Izquierdo, V. Karcagi, J.C. Laurent, H. Lochmüller, M. Meznaric, M. Moggio, M. Mora, M. Posada de l: Promoting the Eurobiobank network for rare diseases: the work of the Eurobiobank project (EBB), Neuromuscular Disorders 13(7-8): 643, 2003
Herczegfalvi Á., Karcagi V.: Újdonságok a neuromuscularis betegségek diagnosztikájában, Neurológia, III. évf. 2. sz., 2004
H. Pikó, I. Nagy, Á. Herczegfalvi, E. Endreffy, V. Karcagi: Deletion pattern of dystrophin gene and carrier analysis in Hungarian families with Duchenne/Becker muscular dystrophies, European Journal of Human Genetics, 2004, Vol. 12, Suppl. 1, p. 215, 2004
V. Karcagi: Overview of the DNA diagnostic work at the laboratory of the National Center for Public Health in Hungary, Seminar, University of Turku, Turku, Finland, 2002
V. Karcagi, H. Pikó, Á. Herczegfalvi: Az izomdystrophiák molekuláris háttere, V. Magyar Genetikai Kongresszus, Siófok, 2003
Á. Herczegfalvi, V. Karcagi, H. Lochmüller: Specifikus neuromuscularis betegségek a roma populációban, A Magyar Gyermekneurológiai, Idegsebészeti, Gyermek – és Ifjúságpszichiátriai Társaság XXVII. Tudományos ülése, 2003
V. Karcagi, H. Pikó, V. Tarnawa, Á. Herczegfalvi, K.Huoponen: A dystrophia myotonica (DM1) betegség nolekuláris azonosítása, A Magyar Gyermekneurológiai, Idegsebészeti, Gyermek – és Ifjúságpszichiátriai Társaság XXVII. Tudományos ülése, 2003
H. Pikó, Á. Herczegfalvi,V. Karcagi: Hordozóság szürés és deléció analízis cDNS próbákkal Duchenne izomdystrophiában, A Magyar Gyermekneurológiai, Idegsebészeti, Gyermek – és Ifjúságpszichiátriai Társaság XXVII. Tudományos ülése, 2003
Karcagi Veronika: A genetikai vizsgálat menete DMD és FSHD esetében, Neurogenetika gyakorló neurológusoknak: Jahn Ferenc Dél-pesti Kórház, 2004
V. Karcagi, D. Augius-Galea, C. Angelini, F. Bignami, O. Cohen, J.H. Di Donato, C. Guitard-Arneau, M. Izquierdo, J.C. Laurent, M. Meznaric, M. Moggio, M. Mora, M. Posada de la Paz, F. Salama, C. Verel: Collecting and sharing tissue and DNA:EuroBioBank, European Conference on Rare Diseases, Luxembourg, 2005
Tímár László, Herczegfalvi Ágnes, Balog Judit, Pikó Henriett, Tarnawa Veronika, Hajdú Krisztina, Tóth András, Karcagi Veronika: Súlyos monogénes betegségek genetikai tanácsadásának és molekuláris genetikai kivizsgálásának eredményei az 1993.-2005. közötti időszak során, 1. Magyar Gyermekorvosok Társasága Nagygyűlése, Balatonszárszó, 2005
Karcagi Veronika, Pikó Henriett, Balog Judit, Tarnawa Veronika, Herczegfalvi Ágnes, Hans Lochmüller: Speciális neuromusculáris betegségek előfordulása a roma populációban, Magyar Tudomány Ünnepe, MTA, 2005
Balog Judit, Pikó Henriett, Karcagi Veronika: Epigenetic influences in human diseases, Conference on Environmental and Genetic Interactions in Diseas Development, Budapest, 2005
Pikó H., Herczegfalvi Á., Balog J., Karcagi V.: Izomdystrophiák molekuláris genetikai vizsgálata, Magyar Neurogenetikai Társaság Nagygyűlése, Galyatető, 2006
Morar B, Gresham D, Angelicheva D, Tournev I, Gooding R, Guergueltcheva V, Schmidt C, Abicht A, Lochmuller H, Tordai A, Kalmar L, Nagy M, Karcagi V, Jeanpierre M, Herczegfalvi A, Beeson D, Venkatarama: Mutation History of the Roma/Gypsies, Am. J. Hum. Genet. 75(4):596-609, 2004



vissza »