Membrán mikrodomének szerepe az angiotenzinreceptor működésében
Angol cím
The role of membrane microdomains in angiotensin receptor function
zsűri
Sejt- és Fejlődésbiológia
Kutatóhely
Élettani Intézet (Semmelweis Egyetem)
résztvevők
Gáborik Zsuzsanna Szaszák Márta Szidonya László
projekt kezdete
2004-01-01
projekt vége
2008-12-31
aktuális összeg (MFt)
13.416
FTE (kutatóév egyenérték)
0.00
állapot
lezárult projekt
Zárójelentés
kutatási eredmények (magyarul)
Kísérleteink során biolumineszcencia rezonancia energiaenergiatranszfer (BRET) módszereket állítottunk be az AT1-es angiotenzinreceptor jelátviteli folyamata során a membrán mikrodoménekben létrejövő fehérje-fehérje kölcsönhatások nyomon követésére. Konfokális mikroszkóppal és BRET módszerrel végzett vizsgálatokkal igazoltuk, hogy az AT1-receptorral ellentétben az AT2-receptor angiotenzin II hatására nem kapcsolódik össze ß-arresztin fehérjékkel, mely arra utal, hogy az AT2-receptor tartós aktiválás esetén nem deszenzitizálódik. Kimutattuk továbbá, hogy AT1-receptort és CB1 kannabinoid receptor együtt expresszáló sejtekben angiotenzin II hatására a CB1-receptor is aktiválódik. Adataink arra utalnak, hogy e válasz közvetítésében az angiotenzin II hatására a membránban található lipidekből felszabaduló endokannabinoidok játszanak szerepet. Bizonyítékot szolgáltattunk arra, hogy a dimerizált AT1-receptorok működése során az egyik receptor gátlása a vele molekuláris kapcsolatban lévő másik receptor működését is gátolhatja. Eredményeink alapján arra következtethetünk, hogy az AT1-receptor terápiás célból történő gátlásakor más receptorok működésében is alapvető változások jöhetnek létre. Tekintettel arra, hogy az angiotenzin II AT1-receptorokon keresztül létrehozott hatásainak gátlása fontos terápiás célpont számos keringési betegség gyógyításakor, e mechanizmusok felismerése fontos támpontot jelenthet a terápiás beavatkozások pontos hatásmechanizmusának megértése szempontjából.
kutatási eredmények (angolul)
We have established methods based on bioluminescence energy transfer (BRET) in order to detect protein-protein interactions, which occur in membrane microdomains during the signal transduction mediated by activation of AT1 angiotensin receptors. We have provided evidence using confocal microscopy and BRET methods that the ß-arrestin binding properties of AT1 and AT2 angiotensin receptors are different. In contrast to AT1 receptors, which interact with β-arrestin molecules upon angiotensin II stimulation, AT2 receptors do not show this interaction under similar conditions, which suggests that continuous activation of AT2 receptors do not lead to their desensitization. We have also shown that in cells co-expressing AT1 angiotensin and CB1 cannabinoid receptors, angiotensin II can induce CB1 receptor activation. Our data suggest that this response is mediated by angiotensin II-stimulated endocannabinoid release from membrane lipids. We have also demonstrated that in AT1 receptor dimers inhibition of one receptor can inhibit the signaling of the other receptor. In conclusion, our findings suggest that during therapeutic inhibition of AT1 receptors in patients the activity of other receptor systems can also be affected. Considering that AT1 receptors are a major target in the treatment of several cardiovascular diseases, elucidation of these mechanisms is potentially very important for the understanding of the consequences of these therapeutic interventions.
Hunyady L; Turu G: The role of the AT1 angiotensin receptor in cardiac hypertrophy: angiotensin II receptor or stretch sensor?, Trends Endocrinol Metab 15: 405-408, 2004
Spät A; Hunyady L: Control of Aldosterone Secretion: A Model for Convergence in Cellular Signaling Pathways, Physiol Rev 84: 489-539, 2004
Hunyady, L.; Catt, K.J.: Pleiotropic AT1 receptor signaling pathways mediating physiological and pathogenic actions of angiotensin II., Mol Endocrinol 20:953-970, 2006
Nikiforovich, G.V.; Zhang, M.; Yang, Q.; Jagadeesh, G.; Chen, H.-C.; Hunyady, L.; Marshall, G. R.; Catt, K.J.: Interactions between conserved residues in transmembrane helices 2 and 7 during angiotensin AT1 receptor activation., Chem Biol Drug Des 68:239-249, 2006
Turu G; Szidonya L; Gáborik Z; Buday L; Spät A; Clark AJL; Hunyady L: Differential ß-arrestin binding of AT1 and AT2 angiotensin receptors., FEBS Letters 580: 41-45, 2006
Karip E; Turu G; Süpeki K; Szidonya L; Hunyady L: Cross-inhibition of angiotensin AT1 receptors supports the concept of receptor oligomerization., Neurochem Int 51: 261-267, 2007
Szidonya, L.; Süpeki, K.; Karip, E.; Turu, G.; Várnai, P.; Clark, A.J.L.; Hunyady, L.: AT1 receptor blocker-insensitive mutant AT1A angiotensin receptors reveal the presence of G protein-independent signaling in C9 cells., Biochem Pharmacol 73: 1582-1592, 2007
Turu G; Simon A; Gyombolai P; Szidonya L; Bagdy G; Lenkei Z; Hunyady L: The role of diacylgycerol lipase in constitutive and angiotensin AT1 receptor-stimulated cannabinoid CB1 receptor activity., J Biol Chem 282: 7753-7757, 2007
Szidonya L; Cserző M; Hunyady L: Dimerization and oligomerization of G-protein-coupled receptors: Debated structures with established and emerging functions., J Endocrinol 196: 435-454, 2008
