Az Ncb5or flavohem reduktáz szerepe a zsírsav deszaturációban és a metabolikus szindróma kialakulásában  részletek

súgó  nyomtatás 
vissza »

 

Projekt adatai

 
azonosító
104113
típus PD
Vezető kutató Kereszturi Éva
magyar cím Az Ncb5or flavohem reduktáz szerepe a zsírsav deszaturációban és a metabolikus szindróma kialakulásában
Angol cím The role of Ncb5or flavoheme reductase in fatty acid desaturation and in development of the metabolic syndrome
magyar kulcsszavak Ncb5or, Scd1, metabolikus szindróma, redox homeosztázis, zsírsav deszaturáció
angol kulcsszavak Ncb5or, Scd1, metabolic syndrome, redox homeostasis, fatty acid desaturation
megadott besorolás
Biológiai rendszerek elemzése, modellezése és szimulációja (Orvosi és Biológiai Tudományok)80 %
Általános biokémia és anyagcsere (Orvosi és Biológiai Tudományok)20 %
Ortelius tudományág: Molekuláris biológia
zsűri Molekuláris és Szerkezeti Biológia, Biokémia
Kutatóhely Orvosi Vegytani, Molekuláris Biológiai és Patobiokémiai Intézet (Semmelweis Egyetem)
projekt kezdete 2012-09-01
projekt vége 2017-08-31
aktuális összeg (MFt) 10.384
FTE (kutatóév egyenérték) 2.10
állapot aktív projekt





 

Zárójelentés

 
kutatási eredmények (magyarul)
A metabolikus szindróma a szénhidrát és lipid anyagcsere együttes zavara, mely a fejlett és a fejlődő országok lakosságának mintegy negyedét érinti. A betegség tünetei és következményei egyértelműek, azonban a pontos patomechanizmus és a megfelelő kezelés nem ismert. A kórkép kandidáns fehérjéje a sztearil-KoA-deszaturáz 1, mely a telítetlen zsírsavak szintézisének kulcsenzime. Hipotézisünk szerint a reakcióhoz szükséges redukáló erőt a metabolikus szindrómával egyértelmű kapcsolatban álló, de funkcionális szempontból nem jellemzett flavohem reduktáz, az Ncb5or biztosítja. A kutatómunka során azonosítottunk két olyan természetesen előforduló Ncb5or variánst (p.E87G, p.E93G), melyek a sejtben rendkívül gyorsan lebomlanak. A mutációk a hem-kötő régió közvetlen közelében találhatók, azok térszerkezetét befolyásolva változathatják a fehérje féléletidejét. Ezen kívül az Ncb5or sejten belüli bizonytalan lokalizációját is tisztáztuk. Több módszerrel bizonyítottuk, hogy ez a szolubilis fehérje a citoszolban található, szemben a korábban feltételezett ER lokalizációval. Végül vizsgáltuk az Ncb5or és az Scd1 kapcsolatát. Számos módszert kidolgoztunk ezen fehérjék és variánsaik in vitro (in vitro transzláció) és in vivo (bakteriális rendszerek) termelésére és tisztítására. Valamint sikerült beállítani egy érzékeny GC-FID alapú módszert a deszaturációs reakció során keletkező telítetlen zsírsavak rutinszerű mérésére.
kutatási eredmények (angolul)
The metabolic syndrome is characterized by abnormalities in carbohydrate and lipid metabolism and affects one fourth of the population in developed and developing countries. Although, symptoms and consequences of the syndrome are well-known, neither the pathomechanism, nor the proper treatment has been resolved. The candidate protein of the disease is the Stearoyl-CoA desaturase 1; the rate limiting enzyme in unsaturated fatty acid synthesis. Based on our hypothesis, the reducing force needed for desaturation is provided by Ncb5or, a recently described, functionally poorly characterized flavoheme reductase. During the research project, two naturally occurred Ncb5or variants were identified (p.E87G, p.E93G), which were characterized by rapid intracellular degradation. The mutations are located near by hem-binding region of the protein, influencing its 3D structure and the half-life of the enzyme. The unsure intracellular localization of Ncb5or was also clarified. In opposite to the previously supposed ER localization, this protein was demonstrated to be localized in cytosol by independent methods. We analyzed the connection between Ncb5or and Scd1. Several methods were elaborated to produce in vitro (in vitro translation) and in vivo (bacterial production) and purify this proteins and their variants. Furthermore, a highly sensitive GC-FID based technique was elaborated to measure properly unsaturated fatty acids produced by desaturational reaction.
a zárójelentés teljes szövege https://www.otka-palyazat.hu/download.php?type=zarobeszamolo&projektid=104113
döntés eredménye
igen





 

Közleményjegyzék

 
Kálmán FS, Lizák B, Nagy SK, Mészáros T, Zámbó V, Mandl J, Csala M, Kereszturi E: Natural mutations lead to enhanced proteasomal degradation of human Ncb5or, a novel flavoheme reductase, Biochimie. 2013 Jul;95(7):1403-10., 2013
Szelényi P, Révész K, Konta L, Tüttõ A, Mandl J, Kereszturi E, Csala M: Inhibition of microsomal cortisol production by (-)-epigallocatechin-3-gallate through a redox shift in the endoplasmic reticulum-A potential new target for treating obes, Biofactors. 2013 Mar 29., 2013
Zámbó V, Simon-Szabó L, Szelényi P, Kereszturi E, Bánhegyi G, Csala M.: Lipotoxicity in the liver, World J Hepatol. 2013 Oct 27;5(10):550-7., 2013
Zámbó V, Tóth M, Schlachter K, Szelényi P, Sarnyai F, Lotz G, Csala M, Kereszturi É: Cytosolic localization of NADH cytochrome b₅ oxidoreductase (Ncb5or), FEBS Lett. 2016 Mar;590(5):661-71., 2016




vissza »