In Vivo Preclinical Studies supporting a Clinical Trial of Allele-Specific Conformational Therapy In Pseudoxanthoma Elasticum  Page description

Help  Print 
Back »

 

Details of project

 
Identifier
121285
Type PD
Principal investigator Dedinszki, Dóra
Title in Hungarian In vivo megalapozó kísérletek, amelyek támogatják a klinikai kipróbálását egy allél-specifikus konformációs változásokon alapuló terápiás kezelésnek Pseudoxanthoma Elasticumban szenvedő betegekben
Title in English In Vivo Preclinical Studies supporting a Clinical Trial of Allele-Specific Conformational Therapy In Pseudoxanthoma Elasticum
Keywords in Hungarian ABCC6 PXE 4-PBA
Keywords in English ABCC6 PXE 4-PBA
Discipline
Molecular biology (Council of Medical and Biological Sciences)70 %
Ortelius classification: Molecular markers and recognition
Experimental pharmacology, drug discovery and design (Council of Medical and Biological Sciences)30 %
Panel Physiology, Pathophysiology, Pharmacology and Endocrinology
Department or equivalent Institute of Enzymology (Research Center of Natural Sciences)
Participants Váradi, András
Starting date 2016-10-01
Closing date 2020-07-31
Funding (in million HUF) 10.058
FTE (full time equivalent) 1.47
state running project





 

Final report

 
Results in Hungarian
Az ABCC6 inaktiválódásához vezető mutációk a vérkeringésben lévő, kalcifikációt gátló PPi koncentrációjának csökkenését eredményezik, ami az örökletes megbetegedésben, Pseudoxanthoma elasticumban (PXE) ektopikus kalcifikáció kialakulásához vezet. Számos klinikailag releváns missense mutáció nem érinti az ABCC6 fehérje transzport funkcióját, de misfolding, mistrafficing és endoplazmatikus retikulumban való megrekedést okoz. Hibás lokalizációt mutató mutánsok „kisegíthetőek” a plazmamembránba az FDA által elfogadott molekula, a 4-phenylbutyrate (4-PBA) segítségével. Olyan hibás lokalizációjú missense mutánsokat azonosítottunk, amelyek transport fukciója megmaradt (R518Q, G992R, T1130M, R1314Q, L1335P, E1400K). pLIVE vektort felhasználva hidrodiamikus farokvéna injektálással (TVI) Abcc6-/- egerekbe juttattuk a mutánsokat, amelyek lokalizációját immuhisztokémiával meghatároztuk: -R518Q főleg IC-ben -G992R IC-ben -T1130M PM-ban -R1314Q főleg IC-ben -L1335P IC-ben -E1400K főleg PM-be fejeződött ki. Abcc6-/- egerek IP injektálással kaptak 4-PBA kezelést TVI injektálást követően. Sem a G992R, sem a R518Q mutáns plazmamembránba történő relokalizációját nem segítette elő a 4-PBA kezelés. Azonban a 4-PBA alkalmazása sikeresnek bizonyult az E1400K, az L1335P és az R1314Q mutánsok esetében. A T1130M mutáns kezelés nélkül is a PM-ban lokalizálódott.
Results in English
Inactivating mutations in ABCC6 result in low circulating levels of the calcification inhibitor PPi and, consequently, ectopic calcification. Several clinically relevant missense mutations do not affect the transport activity of ABCC6, but result in misfolding, mistrafficking and retention of the protein in the endoplasmic reticulum. These mutants can potentially be redirected to the plasma membrane by chemical chaperones like 4-phenylbutyrate (4-PBA). We have identified missense mutations with preserved transport function but with abnormal intracellular processing (R518Q, G992R, T1130M, R1314Q, L1335P, E1400K). We utilized hydrodynamic tail vein injection (TVI) of pLIVE vectors into Abcc6-/- mice and determined the subcellular localization of the mutant ABCC6 by immunohistochemistry. We found the followings: -R518Q mutant showed mainly intracellular (IC) localization -G992R mutant located in the IC -T1130M mutant was targeted to the plasma membrane (PM) -R1314Q mutant located mostly IC -L1335P mutant located IC -E1400K located mostly in the PM Abcc6-/- mice received IP injections of 4-PBA right after the TVI injections. No 4-PBA induced plasma membrane rescue was observed for G992R and R518Q in Abcc6-/- mouse liver. The 4-PBA treatment resulted in plasma membrane targeting in the case of E1400K, L1335P and R1314Q mutants. The T1130M mutant was located in the plasma membrane without 4-PBA treatment.
Full text https://www.otka-palyazat.hu/download.php?type=zarobeszamolo&projektid=121285
Decision
Yes





 

List of publications

 
Eszter Kozák,Bence Szikora,Attila Iliás,Péter K. Jani,Zoltán Hegyi,Zsolt Matula,Dóra Dedinszki,Natália Tőkési,Krisztina Fülöp,Viola Pomozi,György Várady,Éva Bakos,Gabor E. Tusnády,Imre Kacskovics,Andras Várad: Creation of the first monoclonal antibody recognizing an extracellular epitope of hABCC6, FEBS LettersVolume 595, Issue 6 p. 789-798, 2020
Natália Tőkési , Eszter Kozák , Krisztina Fülöp , Dóra Dedinszki , Nikolett Hegedűs , Bálint Király , Krisztián Szigeti , Kitti Ajtay, Zoltán Jakus, Jeremy Zaworski, Emmanuel Letavernier, Viola Pomozi , András Váradi: Pyrophosphate therapy prevents trauma‐induced calcification in the mouse model of neurogenic heterotopic ossification, https://doi.org/10.1111/jcmm.15793, 2020
Pomozi V, Brampton C, Szeri F, Dedinszki D, Kozák E, van de Wetering K, Hopkins H, Martin L, Váradi A, Le Saux O.: Functional Rescue of ABCC6 Deficiency by 4-Phenylbutyrate Therapy Reduces Dystrophic Calcification in Abcc6-/- Mice., J Invest Dermatol., 2017
Dedinszki D, Szeri F, Kozák E, Pomozi V, Tőkési N, Mezei TR, Merczel K, Letavernier E, Tang E, Le Saux O, Arányi T, van de Wetering K, Váradi A.: Oral administration of pyrophosphate inhibits connective tissue calcification., EMBO Mol Med., 2017




Back »