Citoszkeletális izomfehérjék molekuláris mechanikája nanobiotechnológiai módszerekkel  részletek

súgó  nyomtatás 
vissza »

 

Projekt adatai

 
azonosító
37935
típus K
Vezető kutató Kellermayer Miklós Sándor Zoltán
magyar cím Citoszkeletális izomfehérjék molekuláris mechanikája nanobiotechnológiai módszerekkel
Angol cím Molecular mechanics of cytoskeletal muscle proteins using nanobiotechnological methods
zsűri Molekuláris Biológia–Molekuláris Interakciók
Kutatóhely Biofizikai Intézet (Pécsi Tudományegyetem)
résztvevők Grama László
Hild Gábor
Málnási Csizmadia András
Nagy Attila
Tóth Zsolt
projekt kezdete 2002-01-01
projekt vége 2005-12-31
aktuális összeg (MFt) 12.196
FTE (kutatóév egyenérték) 0.00
állapot lezárult projekt





 

Zárójelentés

 
kutatási eredmények (magyarul)
Pályázatunkban elsősorban a titin óriás izomfehérje, annak rekombináns fragmentumai és egyéb izom-citoszkeletális fehérjék nanobiotechnológiai vizsgálatával foglalkoztunk. Egyedi titinmolekulák és rekombináns titin fragmentumok molekuláris mechanikai tulajdonságait és a miozin motorfehérjék in vitro motilitási sajátosságait tanulmányoztuk. Egyedi molekulák mechanikai manipulálására kifejlesztett erőmérő lézercsipesz berendezésünket továbbfejlesztettük, és fluoreszcens technikákkal kombináltuk. Ugyancsak egyedi molekulák mechanikai manipulálására alkalmas atomerőmikroszkópos berendezést helyeztünk üzembe. Atomerőmikroszkópos (AFM) berendezésünket és módszereinket továbbfejlesztettük, mellyel lehetővé vált egyedi fehérjék célzott, in situ mechanikai manipulálása. Az AFM módszert sikerrel kombináltuk teljes belső visszaverődés fluoreszcencia mikroszkópiával (TIRFM), mellyel lehetővé vált sejtek és molekulák egyidejű topográfiai és fluoreszcenciás vizsgálata. Eredeti megfigyeléseket tettünk a titin lokális rugalmasságának és mecahnikai stabilitásának, aktinnal való kölcsönhatásainak és a dezmin intermedier filamentumok nanomechanikai viselkedésének megismerésében.
kutatási eredmények (angolul)
Our project primarily addressed the nanobiotechnology of the giant muscle protein titin, the recombinant fragments of titin, and other filamentous proteins of the muscle cytoskeleton. We examined the molecular mechanics of individual molecules of titin and its recombinant fragments and the motile characteristics of myosin motor proteins with novel methodologies. Our force-measuring optical tweezers instrument was developed further and was combined with fluorescence imaging. We have installed an atomic force microscope system capable of mechanical manipulation of single biomolecules. We have developed our AFM system and analysis further so that it enables us to carry out in situ force spectroscopic measurements. Our AFM was combined with total internal reflection fluorescence microscopy that enables us to follow the surface topography and mechanics of the sample together with its fluorescence properties, in a spatially and temporally synchronized fashion. We have made and published original observations about the local and global nanomechanical behavior of titin, its interactions with actin filaments, and the elasticity and force-driven transitions of the muscle-specific desmin intermediate filaments.
a zárójelentés teljes szövege http://real.mtak.hu/409/
döntés eredménye
igen





 

Közleményjegyzék

 
Nagy, A., Grama, L., Huber, T., Bianco, P. , Trombitás, K., Granzier, H.L. and Kellermayer, M.S.Z.: Hierarchical extensibility in the PEVK domain of skeletal-muscle titin, Biophys J. 89(1), 329-336, 2005
Watanabe, K., Nair, P., Labeit, D., Kellermayer, M.S.Z., Greaser, M., Labeit, S., Granzier, H.L.: Molecular mechanics of cardiac titin’s PEVK and N2B sequence elements., Biophys J. 84, 244a, 2003
Watanabe, K., Muhle-Goll, C., Kellermayer, M.S.Z., Labeit, S., Granzier, H.L.: Different molecular mechanics displayed by titin?s constitutively and differentially expressed tandem Ig segments, J. Struct Biol.137, 248-258, 2002
Watanabe, K., Nair, P., Labeit, D., Kellermayer, M.S.Z., Greaser, M., Labeit, S., Granzier, H.L.: Molecular mechanics of cardiac titin?s PEVK and N2B spring elements, J. Biol. Chem. 277, 11549-11558, 2002
Kellermayer, M.S.Z., Smith, S., Bustamante, C. and Granzier, H.L.: Force-driven folding and unfolding transitions in single titin molecules: single polymer strand manipulation, NATO Science Series 3. High Technology 87, 311-326, 2002
Kellermayer, M.S.Z. and Grama, L.: Stretching and visualizing titin molecules: combining structure, dyamics and mechanics, J. Muscle Res. Cell Motil. 23, 499-511, 2002
Kellermayer, M.S.Z., Bustamante, C. and Granzier, H.L.: Mechanics and structure of titin oligomers explored with atomic force microscopy, Biochem. Biophys. Acta Bioenergetics 1604, 105-114, 2003
Trombitás, K., Wu, Y., Greaser, M., Kellermayer, M.S.Z., Labeit, S. and Granzier, H.L.: Molecular basis of stress relaxation in soleus fibers: assessment of the role of immunoglobulin-like domain unfolding, Biophys. J. 85 (5) 3142-3153, 2003
Nagy, A., Cacciafesta, P., Grama, L., Kengyel, A., Málnási-Csizmadia, A., and Kellermayer, M.S.Z.: Differential actin binding along the PEVK domain of skeletal-muscle titin, J. Cell Sci. 117, 5781-5789, 2004
Kellermayer, M.S.Z., Grama, L., Karsai, Á., Nagy, A., Kahn, A., Datki, Z. and Penke, B.: Reversible unzipping of amyloid ß-fibrils, J. Biol. Chem. 280(9), 8464-8470, 2004
Kellermayer, M.S.Z.: Visualizing and manipulating individual protein molecules, Physiol. Measurement. 26, R119-R153, 2005
Watanabe, K., Muhle-Goll, C., Kellermayer, M.S.Z., Labeit, S., Granzier, H.L.: Characterizing single molecules of the giant muscle protein titin with atomic force microscopy, Biophys. J. 82, 55a, 2002
Grama, L. Málnási-Csizmadia, A., Bagshaw, C.R., Kellermayer, M.S.Z.: Mechanical characterization of single green fluorescent protein homopolymer molecules, Biophys. J. 82, 193a, 2002
Kellermayer, M.S.Z., Trombitás, K., Granzier, H.L.: Formation and elasticity of multi-molecular bundles of titin, Biophys. J. 82, 370a, 2002
Cacciafesta, P. Lombardi, V., Kellermayer, M.S.Z.: Single-sarcomere assay for actomyosin motility and force measurement, Biophys J. 84, 450a, 2003
Grama, L., Nagy, A., Málnási-Csizmadia, A., Kellermayer, M.S.Z.: Mechanical stability of an eight-domain segment in titin’s differentially-spliced tandem-Ig region, Biophys J 84, 563a, 2003
Nagy, A., Grama, L., Málnási-Csizmadia, A., Kellermayer, M.S.Z: Expression and molecular mechanics of skeletal-muscle titin’s PEVK segment, Biophys J. 84, 563a, 2003
Kellermayer, M.S.Z., Datki, Z. and Penke, B.: Force-driven reversible structural transitions in amyloid fibrils, Biophys J. 86, 2004
Kiss, B. and Kellermayer, M.S.Z.: Nanomechanics of desmin intermediate filaments., Biophys J. 86, 2004
Nagy, A., Cacciafesta, P., Grama, L., Kengyel, A., Málnási-Csizmadia, A., and Kellermayer, M.S.Z.: Differential actin binding along the PEVK domain of skeletal-muscle titin, Biophys J. 86, 2004
Nagy, A., Cacciafesta, P., Grama, L., Kengyel, A., Málnási-Csizmadia, A., and Kellermayer, M.S.Z.: Elastic and actin-binding properties of full-length skeletal muscle titin’s PEVK domain, J. Muscle Res. Cell Motil. 25, 263, 2004
Kellermayer, M.S.Z., Trombitás, K., Bustamante, C. and Granzier, H.L.: Elasticity and structure of titin oligomers explored with atomic force microscopy, XXXII. Membrán-transzport Konferencia. May 23-26., 2002. Sümeg., 2002
Cacciafesta, P., Lombardi, V. and Kellermayer, M.S.Z.: Single-sarcomere assay for actomyosin motility and force measurement., XXXII. Membrán-transzport Konferencia. May 23-26., 2002. Sümeg., 2002
Nagy, A., Málnási-Csizmadia, A., Kellermayer, M.S.Z.: A titin óriásfehérje PEVK doménjának expressziója és molekuláris mechanikája, XXXII. Membrán-transzport Konferencia. May 23-26., 2002. Sümeg., 2002
Kellermayer, M.S.Z., Grama, L. and Somogyi, B.: Visualization and mechanics of single titin molecules., EC Network Meeting, March 21-24, 2002, Monte Ortone, Italy., 2002
Cacciafesta, P., Lombardi, V. and Kellermayer, M.S.Z.: Single-sarcomere assay for actomyosin motility and force measurement., EC Network Meeting, March 21-24, 2002, Monte Ortone, Italy., 2002
Grama, L., Somogyi, B. and Kellermayer, M.S.Z.: Global configuration of single titin molecules studied via chain-associated rhodamine dimers., Howard Hughes Medical Institute 2002 Meeting of International Research Scholars. Cairns, Australia, June 20-23, 2002., 2002
Kellermayer, M.S.Z.: Single-molecule mechanics of titin and its recombinant fragments, EMBO/HHMI Central European Scientists Meeting, Warsaw, 2003. May 24-26., 2003
Grama L., Nagy A., Málnási-Csizmadia A., Kellermayer M.S.Z.: A titin tandem-IG régiójából származó doménoktamer mechanikai stabilitásának vizsgálata, XXXIII. Membrán-transzport Konferencia. May 20-23., 2003. Sümeg., 2003
Nagy A., Grama L., Málnási-Csizmadia A., Kellermayer M.S.Z.: A vázizom titin PEVK szegmens molekuláris mechanikája, XXXIII. Membrán-transzport Konferencia. May 20-23., 2003. Sümeg., 2003
Nagy B., Gecsei G., Tóth Zs., Kellermayer M.S.Z.: Szívizom miozin motilitás in vitro analízise, XXXIII. Membrán-transzport Konferencia. May 20-23., 2003. Sümeg., 2003
Kellermayer. M.S.Z.: Biomolekulák vizsgálata nanotechnológiaimódszerekkel., XXXIII. Membrán-transzport Konferencia. May 20-23., 2003. Sümeg., 2003
Miklós S.Z. Kellermayer, Attila Nagy, László Grama, and András Málnási-Csizmadia.: Single-molecule methods, 7th Symposium on Instrumental Analysis. Pécs, September 21-24, 2003
Nagy, A., Cacciafesta, P., Grama, L., Kengyel, A., Málnási-Csizmadia, A., and Kellermayer, M.S.Z.: Differential actin binding along the PEVK domain of skeletal-muscle titin, EMBO/HHMI Central European Scientists Meeting, Prague, 2004. February 21-23., 2004
Nagy, A., Cacciafesta, P., Grama, L., Kengyel, A., Málnási-Csizmadia, A., and Kellermayer, M.S.Z.: Differential actin binding along the PEVK domain of skeletal-muscle titin, Alpbach Workshop on Molecular Motors. Alpbach, Austria, March 28-April 2, 2004., 2004
Nagy, A., Cacciafesta, P., Grama, L., Kengyel, A., Málnási-Csizmadia, A., and Kellermayer, M.S.Z.: Differenciált F-aktin kötés a vázizom titin PEVK doménjében., XXXIV. Sümegi Membránkonferencia. Sümeg, 2004., 2004
Kellermayer Miklós S.Z., Nagy Attila, Karsai Árpád, Kengyel András, Huber Tamás, Kiss Balázs, Amram Kahn, Tóth Péter, Grama László: Egyedi biomolekulák vizualizálása és mechaikai manipulálása atomerömikroszkóppal, A Magyar Mikroszkópos Társaság 2004. évi Konferenciája. Balatonalmádi, 2004. május 27-29., 2004
Miklós S.Z. Kellermayer, László Grama, Attila Nagy, András Málnási-Csizmadia: Molecular mechanics of skeletal-muscle titin and its recombinant fragments, Howard Hughes Medical Institute 2004 Meeting of International Research Scholars. Tallinn, Estonia, June 22-27, 2004., 2004
Miklós S.Z. Kellermayer, Attila Nagy, Árpád Karsai, András Kengyel, Tamás Huber, Balázs Kiss, Amram Kahn, Péter Tóth and László Grama.: Mechanical manipulation of individual biomolecules, Meeting of the Croatian Society for Biochemistry and Molecular Biology. September 30, October 2, 2004., 2004
Kasianowicz, J., Kellermayer, M.S.Z. and Deamer, D: Structure and Dynamics of Confined Polymers, NATO Science Series 3. High Technology. Vol. 87. Kluwer Academic Publishers, Dordrecht, Boston, London, 2002
Linke, W.A., Granzier, H.L., and Kellermayer, M.S.Z.: Mechanics of Biological Molecules, Kluwer Academic Publishers. Dordrecht, Boston, London, 2003
Grama, L., Nagy, A., Scholl, C., Huber, T. and Kellermayer, M.S.Z.: Local variability in the mechanics of titin's tandem Ig segments, Croat. Chem. Acta 78, 405-400, 2005
Kellermayer, M.S.Z., Grama, L., Karsai, Á., Nagy, A., Kahn, A., Datki, Z. and Penke, B.: Reversible unzipping of amyloid ß-fibrils, Biophys. J. 88, 198A-199A, 2005
Nagy, A., Cacciafesta, P., Grama, L., Kengyel, A., Málnási-Csizmadia, A., and Kellermayer, M.S.Z.: Elastic and actin-binding properties of full-length skeletal muscle titin?s PEVK domain, Biophys. J. 88, 2005., 2005
Kellermayer, M. S., Grama, L., Karsai, Á., Nagy, A., Kahn, A., Datki, Z., Penke, B.: Structural dynamics of amyloid explored by manipulating individual fibrils, FEBS Journal 272 (s1) F2-016P, 2005
Grama, L., Nagy, A., Scholl, C., Huber, T. and Kellermayer, M.S.Z.: Local variability in the mechanics of titin?s tandem Ig segments, EMBO/HHMI Central European Scientists Meeting, Budapest, 2005. February 7-9., 2005
Bianco, P., Nagy, A., Grama, L. and Kellermayer, M.S.Z.: Interaction forces between F-actin and titin?s PEVK domain., EMBO/HHMI Central European Scientists Meeting, Budapest, 2005. February 7-9., 2005
Karsai, A., Grama, L., Nagy, A. and Kellermayer, M.S.Z.: Oriented, potassium-dependent binding of amyloid beta-25-35 fibrils to mica, EMBO/HHMI Central European Scientists Meeting, Budapest, 2005. February 7-9., 2005
Kellermayer, M.S.Z., Grama, L., Karsai, A., Nagy, A., Kahn, A., Datki, Z. and Penke, B.: Reversible mecahnical unzipping of amyloid beta-fibrils, EMBO/HHMI Central European Scientists Meeting, Budapest, 2005. February 7-9., 2005
Nagy, A., Grama, L., Huber, T., Bianco, P., Trombitas, K., Granzier, H.L. and Kellermayer, M.S.Z.: Hierarchical extensibility in the PEVK domain of skeletal-muscle titin, EMBO/HHMI Central European Scientists Meeting, Budapest, 2005. February 7-9., 2005
Kellermayer M.S.Z., Nagy A., Karsai Á., Pasquale B., Kengyel A., Huber T., Grama L.: Szinkronizált atomer?- és evaneszcens mező fluoreszcencia mikroszkópia (Synchronized AFM and TIRFM), A Magyar MMikroszkópos Társaság Konferenciája. Balatonalmádi, 2005. May 26-28., 2005
A. Nagy, L. Grama, P. Cacciafesta, A. Kengyel, T. Huber, P. Bianco, K. Trombitás, H.L. Granzier and M.S.Z. Kellermayer: Elastic and actin-binding properties of full-length skeletal muscle titin?s PEVK domain, Howard Hughes Medical Institute 2005 Meeting of International Research Scholars. Merida, Mexico, June 22-26, 2005., 2005
A. Nagy, L. Grama, T. Huber, P. Bianco, K. Trombitás, H.L. Granzier and M.S.Z. Kellermayer.: Hierarchical extensibility in the PEVK domain of skeletal-muscle titin, Albach Workshop on Coiled-coils. Alpbach, Austria, September 11-16., 2005
Kellermayer, M.S.Z.: Egyedi amiloid fibrillumok manipulálása nanotechnológiai módszerekkel, A Magyar Biofizikai Társaság Közgyűlése, Debrecen, 2005. június 27-29, 2005
M.S.Z. Kellermayer, Á. Karsai, A. Nagy, L. Grama, A. Kengyel, Z. Mártonfalvi, Z. Datki and Botond Penke.: Mechanical manipulation of amyloid beta fibrils, Albach Workshop on Coiled-coils. Alpbach, Austria, September 11-16., 2005
B. Kiss and M.S.Z. Kellermayer: Nanomechanics of desmin filaments, Albach Workshop on Coiled-coils. Alpbach, Austria, September 11-16., 2005




vissza »