A szilva himlő vírus elleni rezisztencia kialakításának lehetősége csonthéjas növényekben  részletek

súgó  nyomtatás 
vissza »

 

Projekt adatai

 
azonosító
43388
típus K
Vezető kutató Palkovics László
magyar cím A szilva himlő vírus elleni rezisztencia kialakításának lehetősége csonthéjas növényekben
Angol cím Developing new stratagies for plum pox virus resistance in stone fruit trees
zsűri Agrártudomány 1
Kutatóhely Mezőgazdasági Biotechnológiai Kutatóintézet (Nemzeti Agrárkutatási és Innovációs Központ)
résztvevők Mészáros Annamária
projekt kezdete 2003-01-01
projekt vége 2006-12-31
aktuális összeg (MFt) 15.040
FTE (kutatóév egyenérték) 0.00
állapot lezárult projekt





 

Zárójelentés

 
kutatási eredmények (magyarul)
Elkészítettünk egy konstrukciót, mely tartalmazta a karfiol mozaik vírus 35S promóterét, a NOS terminációs szignált, és e két szabályozó régió között a hasznos gént, vagyis a szilva himlő vírus köpenyfehérje génjét és a 3’ nem kódoló régióját inverted repeat formában nem transzlálható módon, köztük pedig egy intron szekvenciát. A kanamicin mentes konstrukcióval való dohány transzformálás után 477 vonalat neveltünk fel, melyből 15 pozitív eredményt adott PCR-rel. Később a 15 egyedből csupán egy tartotta meg transzgénikus tulajdonságát. Transzgénikus növényekkel oltási kísérleteket végeztünk. Az eredmények szerint a transzgénikus rezisztens rész sem alanyként, sem nemesként nem tudta biztosítani a rezisztenciát a nem rezisztens részeknek. Fontos kérdés, hogy ha egy rezisztens növényt más vírus felülfertőz, a növény elveszti-e rezisztenciáját. Az eredmények szerint egy rezisztens növényt, ha más vírus felülfertőz, akkor sem fogja elveszteni az adott vírusra a rezisztenciáját. A szilva transzformációs kísérletekben levélnyelet és sziklevelet transzformáltunk három különböző konstrukcióval, 433 hajtást neveltünk fel. Az első vizsgálatokban 81 volt PCR pozitív. Nagy részüknél a második vizsgálat negatív eredményt adott. Azonosítottunk egy a CP génben deléciós izolátumot, mely nem minden antiszérummal volt kimutatható megfelelő hatékonysággal. A rekombináns izolátumokat vizsgálva azonosítottunk egy második rekombinációs pontot is a P3 génben.
kutatási eredmények (angolul)
A new gene construct was designed containing the Cauliflower mosaic virus 35S promoter and NOS termination signal. Between these regions, the construct contained the PPV CP gene in inverted repeat form with an intron spacer sequence. Nearly 500 plants were grown up from transformation with these kanamycin marker free construct. Only 15 were positive by PCR for the transgene, but at the end only one stored the transgenic behaviour, which was resistant against PPV as well. Grafting experiment was done, concluding that the transgenic resistant part could not protect the non transgenic section. We demonstrated that the plant will not lose the transgenic mediated resistance if another virus infection is present using grafting experiments. In plum transformation experiment using petiole and cotyledon 433 shoot were produced. Out of more than 400 plants 81 were transgenic by PCR in he first PCR experiments. The second round most of them were PCR negative. A PPV isolate was identified containing a large deletion in he coat protein gene. This isolate was not detectable every antisera efficiently. Studying recombinant PPV isolates a second recombination point was identified int he P3 gene of the virus.
a zárójelentés teljes szövege http://real.mtak.hu/1053/
döntés eredménye
igen





 

Közleményjegyzék

 
Palkovics L és Szathmáry E: Szilva himlő vírus - a csonthéjasok legfontosabb víruseredetű kórokozója, Gyakorlati Agrofórum, 2006
Varrelmann M and Palkovics L: Use of Insertion-scanning mutagenesis to characterize a viral protein: Creation of a high-density suppressor of gene silencing functional map of the Plum Pox Virus helper, XIIIth International Congress of Virology, San Francisco, USA, July 23-28., 2005
Mészáros A, Balla I and Palkovics L: Investigation on the morphogenetic capacity of different tissues of plum (Prunus domestica L.)., COST 843: Developmental Biology of Regeneration, 3rd Meeting, Ovideo, Spain, 29-31 January., 2004
Varrelmann M, Maiss E und Palkovics L: Charakterisierung der „suppressor of gene silencing“-Funktion des HCPro des Plum pox virus mittels Insertions „scanning“ Mutagenese., Deutsche Phytomedizinische Gesellschaft, Arbeitskreises ''Viruskrankheiten der Pflanzen'', 29.-30.03. Braunschweig, 2004
Palkovics L, Novák Nádudvari J, Szathmáry E, Tóbiás I and Balázs E: Characterization of an altered isolate of Plum pox virus containing shorter coat protein gene., European Meeting ’04 on Plum Pox, Rogów, Poland 1-4 September., 2004
Glasa M, Palkovics L, Kominek P, Labonne G, Paunovic S, Pittnerova S, Kudela O, Candresse T and Subr ZW: Geographically and temporally distant natural recombinant isolates of Plum pox virus are genetically very similar and form a unique subgroup (PPV-Rec)., European Meeting ’04 on Plum Pox, Rogów, Poland 1-4 September., 2004
Palkovics L, Maiss E and Varrelmann M: Untersuchungen zur Funktion der Helferkomponente Protease (HCpro) des Plum pox virus (PPV) als Pathogenitätsfaktor und Suppressor des posttranskriptionalen "gene silencing"., Deutsche Pflanzenschutztagung September 20-23, Univesitat Hamburg, Hamburg, Deutchland., 2004
Palkovics L, Nádudvari JN, Szathmáry E and Balázs E: Plum pox virus, the devastating disease agent in the European stone fruit orchards., 6th Annual meeting of Research Centre for Plant Growth and Development, 18-19 November, University of KwaZulu-Natal, Pietermaritzburg, South Africa., 2004
Szathmáry E, Tóbiás I és Palkovics L: Egy rövidebb köpenyfehérjét tartalmazó természetes szilvahimlő virus (Plum pox virus) izolátum jellemzése., Magyar Mikrobiológiai Társaság Nagygyűlése, Keszthely, október 7-9., 2004
Palkovics L, Novák Nádudvari J, Szabó L, Szathmáry E, Tóbiás I and Balázs E: Characterisation of a Plum pox virus isolate with truncated coat protein., XIIIth International Congress of Virology, San Francisco, USA, July 23-28., 2005
Palkovics L and Varrelmann M: The PTK-motif of the Plum Pox Virus helper component proteinase, contributing to potyviral aphid transmission, is additionally involved in symptom severity, host recognit, XIIIth International Congress of Virology, San Francisco, USA, July 23-28., 2005
Palkovics L, Varrelmann M, Glasa M, Gáborjányi R, Salamon P, Tóbiás I and Balázs E: Plum pox virus in Hungary: State of the art., PPV NE1006 American/Canadian Meeting, Niagara Falls, Ontario, Canada, October 24-27., 2005
Glasa M, Palkovics L, Komínek P, Labonne G, Pittnerová S, Kúdela O, Candresse T and Subr Z: Geographically and temporally distant natural recombinant isolates of Plum pox virus are genetically very similar and form a unique PPV subgroup., Journal of General Virology, 85(9) 2671-2681., 2004
Szathmáry E, Nádudvariné Novák J, Tóbiás I és Palkovics L: Egy rekombináns és köpenyfehérjéjében deléciót hordozó szilva himlő vírus izolátum jellemzése., 51. Növényvédelmi Tudományos Napok, Budapest, február 22-23., 2005
Szathmáry E, Nádudvariné Novák J, Tóbiás I és Palkovics L: Egy rekombináns és köpenyfehérjéjében deléciót hordozó szilva himlő vírus izolátum jellemzése., 51. Növényvédelmi Tudományos Napok, Budapest, február 22-23., 2005
Varrelmann M, Maiss E, Pilot R and Palkovics L: Use of insertion scanning linker mutagenesis for functional mapping of Plum pox virus helper component proteinase suppressor of gene silencing., Journal of General Virology 88, 1005-1015., 2007
Szathmári E, Dragoyski K, Hristova D, Stoev A, Tóbiás I and Palkovics L: Molecular characterization of some Plum pox virus isolates originated from Troyan region, Bulgaria., Plant Science 43, 407-412., 2007
Palkovics L, Varrelmann M and Maiss E: Generation of a high-density map of the helper component proteinase (HC-pro) suppressor of gene silencing function, using transposition based in vitro insertional mutagenesis., Gesselschaft für Virologie, Annual Meeting. Hannover, March 16-19., 2005
Szathmáry E, Tóbiás I és Palkovics L: Egy különös, Bulgáriából származó rekombináns szilva himlő vírus (Plum pox virus) izolátum jellemzése., 53. Növényvédelmi Tudományos Napok, Budapest, február 20-21. pp27., 2007





 

Projekt eseményei

 
2014-01-02 14:54:30
Kutatóhely váltás
A kutatás helye megváltozott. Korábbi kutatóhely: (Nemzeti Agrárkutatási és Innovációs Központ), Új kutatóhely: Mezőgazdasági Biotechnológiai Kutatóintézet (Nemzeti Agrárkutatási és Innovációs Központ).




vissza »