Gabonafélék petesejtjeinek és zigótáinak krioprezerválása  részletek

súgó  nyomtatás 
vissza »

 

Projekt adatai

 
azonosító
46682
típus K
Vezető kutató Darkó Éva
magyar cím Gabonafélék petesejtjeinek és zigótáinak krioprezerválása
Angol cím Cryopreservation of gametes in cereals
zsűri Agrártudomány 1
Kutatóhely Növényélettani Osztály (MTA Agrártudományi Kutatóközpont)
résztvevők Ambrus Helga Márta
Bakos Ferenc
Barnabás Beáta
Jäger Katalin
Timár Ilona
projekt kezdete 2004-01-01
projekt vége 2007-12-31
aktuális összeg (MFt) 10.062
FTE (kutatóév egyenérték) 0.00
állapot lezárult projekt





 

Zárójelentés

 
kutatási eredmények (magyarul)
A pályázat célja a növényi petesejtek ill. zigóták krioprezelválási módszerének kidolgozása gabonaféléken. Meghatároztuk azokat a módszertani feltételeket (adaptációs közeg összetétele, ideje, krioprotektáns anyagok minősége, a fagyasztás módja és a rehidratáció körülményei), melyek segítségével 2 módszert is sikeresen alkalmaztunk növényi petesejtek és zigóták mélyhűtésére. Megállapítottuk, hogy a krioprezervációs módszer sikeressége nagymértékben függ a búza fajtájától. A hidegérézékeny Siete cerros petesejtek csak lassú hűtési eljárással, a hidegtűrő Mironovszkaja az un. vitrifikációs módszerrel is fagyaszthatók. A petesejtekre kidolgozott krioprezervációs módszert sikeresen alkalmaztuk zigóták mélyhűtésére is. Zigóták esetében 10-15%-al nagyobb hatékonyság érhető el. Kimutattuk továbbá, hogy - az aszkorbinsav kedvezően befolyásolja a petesejtek ill. zigóták túlélési képességét úgy a dehidratációs, mind a rehidratációs fázisban. - a krioprotektáns anyagok közül a DMSO, ellentétben számos szomatikus növényi szövettel és sejttel, toxikus hatású a petesejtekre. Helyette a PG sikeresen alkalmzaható. - az előkezelések alacsony hőmérsékleten (T=0°C) végzése mérsékli a krioprotektáns anyagok kedvezőtlen hatását. Strukturális vizsgálatokkal kimutattuk, hogy a krioprezerválás során a petesejtek ill. zigóták belső citoplazmaszerkezete jelentős mértékben árendeződik: az organellumok a plazma sejtmag körüli részén koncentrálódtak, míg a perifériális részen megjelent egy világosabban festődő, organellumokat alig tartalmazó citoplazmarégió.
kutatási eredmények (angolul)
The aim of the project was to elaborate cryopreservation methods for plant egg-cells and zygotes. The methodological conditions (composition of the adaptation medium, duration of dehydration, quality of cryoprotectants, freezing method, rehydration conditions) were elaborated for deep freezing of plant egg-cells and zygotes. The type of cryopreservation method required and the success with which it could be applied were found to depend greatly on the variety of wheat used in the experiments. While the egg-cells of the cold-sensitive variety Siete Cerros could only be frozen at a slow rate, the vitrification technique was more efficient for the cold-tolerant variety Mironovskaya 808. The cryopreservation method elaborated for egg-cells was also successfully applied to zygotes, where the success rate was 10–15% higher. Moreover, it was demonstrated that –ascorbic acid has a favourable influence on the survival rate of egg-cells and zygotes in both the dehydration and rehydration stages, –among the cryoprotectants tested, DMSO, which can be successfully applied to somatic plant tissues and cells, was found to be toxic to egg-cells, and had to be replaced by PG, –carrying out treatment at low temperature (0°C) reduced the negative effects of the cryoprotectants. Structural analyses revealed a rearrangement of the internal cytoplasm structure in egg-cells and zygotes during cryopreservation: the cell organelles became concentrated in the plasma region around the nucleus, while a more lightly stained cytoplasm region containing hardly any organelles appeared in the peripheral regions.
a zárójelentés teljes szövege http://real.mtak.hu/1535/
döntés eredménye
igen





 

Közleményjegyzék

 
Fábián A., Jäger K., Darkó É., Barnabás B.: Freeze-preservation of wheat egg cells by vitrification, Acta Physiologiae Plantarum (submitted), 2008
Fábián A; Darkó É; Jager K; Barnabás B: A búza női ivarsejtek krioprezervációjában alkalmazott technikai paraméterek optimalizálása., In: XII. Növénynemesítési Napok, Összefoglaló, Akadémiai Kiadó, Budapest pp.89., 2006
Fábián A., Jäger K., Darkó É., Barnabás B.:: Búza petesejtek krioprezervációja vitrifikációs módszerrel., In: XIII. Növénynemesítési Napok, Összefoglaló, Akadémiai Kiadó, Budapest pp.116., 2007
Fábián A., Darkó É., Jäger K., Barnabás B.: A búza (Triticum aestivum L.) női ivarsejtjeinek krioprezervációja vitrifikációs módszer alkalmazásával., Növénytermelés 56, 5-6, 321-332, 2007





 

Projekt eseményei

 
2014-01-07 16:08:23
Kutatóhely váltás
A kutatás helye megváltozott. Korábbi kutatóhely: Növényi Sejtbiológiai Osztály (MTA Agrártudományi Kutatóközpont), Új kutatóhely: Növényélettani Osztály (MTA Agrártudományi Kutatóközpont).




vissza »