A búzaszem textúráját meghatározó fehérjék tanulmányozása in vitro rendszerekben  részletek

súgó  nyomtatás 
vissza »

 

Projekt adatai

 
azonosító
48401
típus PD
Vezető kutató Gárdonyi Márk
magyar cím A búzaszem textúráját meghatározó fehérjék tanulmányozása in vitro rendszerekben
Angol cím Study of proteins that determine the texture of wheat grain in in vitro systems
zsűri Agrártudomány 1
Kutatóhely Növényélettani és Molekuláris Növénybiológiai Tanszék (Eötvös Loránd Tudományegyetem)
projekt kezdete 2004-10-01
projekt vége 2007-09-30
aktuális összeg (MFt) 18.203
FTE (kutatóév egyenérték) 0.00
állapot lezárult projekt





 

Zárójelentés

 
kutatási eredmények (magyarul)
A pályázat keretében felszaporítottuk, és klónoztuk 3 búza friabilin fehérje génjét. A klónozott géneket E. coli-ban kifejeztettük. A puroindolinA génből létrehoztunk 3 mutáns változatot is, hogy a cisztein hidak és a triptofán gazdag hurok szerepét tudjuk vizsgálni. A termelt fehérjékkel funkcionális vizsgálatokat végeztünk. Bizonyítottuk, hogy mind a természetes eredetű, mind a heterológ rendszerben előállított friabilin fehérjék specifikusan kötődnek a tisztított búzakeményítőhöz. Igazoltuk, hogy a kenyérbúzából izolált keményítőhöz hasonlóan durum búzából származó keményítő is köti a friabilineket. Munkánk során meggyőzően bizonyítottuk, hogy egy kb. 30 kDa méretű gliadin típusú fehérjefrakció jelen van az érett keményítőszemcsék felszínén. Ezek a fehérjék képesek a keményítőhöz kötődni in vitro, puroindolinok jelenlétében és hiányában egyaránt. Az α-gliadinok és a keményítő közötti erős kötés magyarázhatja azt a tényt, hogy ha nincs jelen mindkét vad típusú puroindolin, a búzaszem kemény. A puroindolinok és a szemkeménységet befolyásoló tartalékfehérjék vizsgálatával úttörő munkát végzünk, mely lehetővé teszi a keménység szélesebb látókörű szemlélését, megértését.
kutatási eredmények (angolul)
We have amplified and cloned 3 wheat friabilin genes. The friabilin genes were expressed in E. coli and the produced proteins were used in functional studies. We have also designed and expressed 3 puroindoline A mutant to determine the role of cistein bridges and the tryptophan rich loop. We were able to show that both natural and heterologously expressed frabilin binds starch, including durum starch. We have proved that an approx. 30 kDa sized gliadin type protein fraction is present on the surface of mature starch granules. These proteins are able to bind starch in vitro, regardless whether puroindolines are present or absent. The strong interaction between α-gliadins and starch could be the cause of kernel hardness in the absence of wild type puroindolines. Investigating puroindolines and storage proteins effecting texture provides necessary information to understand wheat kernel hardness.
a zárójelentés teljes szövege http://real.mtak.hu/1795/
döntés eredménye
igen





 

Közleményjegyzék

 
Bakó A, Gárdonyi M, Tamás L: In vitro starch binding experiments: study of the proteins related to grain hardness of wheat., 7th International Wheat Conference; Abstracts p. 93., 2005
Csóti I, Bakó A, Tamás L, Gárdonyi M: Investigation of the starch-binding properties of wheat friabilin., Acta Biologica Szegediensis 49: 29-30, 2005
Bakó A, Gárdonyi M, Tamás L: Interactions between the Starch Granule Surface and Its Associated Proteins., Abstract #22. 2006 Gluten Workshop, 2006
Zs. B. Nagy, M. Gárdonyi, A. Mészáros, Z. Varga-Orvos, R. G. Solomon, L. Tamás: Multiple site-directed mutagenesis strategy based on total RNA and RT-PCR method., Mol. Biotechnol. 37(3):206-211, 2007




vissza »