Characterization of cholesterol binding monoclonal IgB antibodies
zsűri
Molekuláris és Szerkezeti Biológia, Biokémia
Kutatóhely
Gyulladásbiológia és Immungenomikai Kutatócsoport (HUN-REN Támogatott Kutatócsoportok Irodája)
projekt kezdete
2005-01-01
projekt vége
2008-12-31
aktuális összeg (MFt)
4.960
FTE (kutatóév egyenérték)
2.16
állapot
lezárult projekt
Zárójelentés
kutatási eredmények (magyarul)
Az általunk korábban létrehozott anti-koleszterin ellenanyagot termelő hibridómákból kiválasztottunk kettőt, amelyek nagy mennyiségben szekretáltak IgG3 izotípusú ellenanyagot, és ezek az ellenanyagok elővizsgálatokban erősen kötődtek koleszterinnel fedett ELISA lemezekhez. Miután megtermeltük és kitisztítottuk a szükséges mennyiségű ellenanyagot, elvégeztük a két ellenanyag (AC1 és AC8) részletes karakterizálását. Megvizsgáltuk az ellenanyagok lipid- ill. ezen belül szteroid specificitását, valamint a koleszterinnel való kapcsolat affinitását. Megtörtént a lipoproteinek és a mACHA-k reakciójának jellemzése is. Vizsgáltuk az ellenanyagok kötődését endotélsejtekhez és különböző leukocitákhoz. Minthogy a mACHA-k csak ez utóbbiakhoz kötődtek, a tervbe vett funkcionális teszteket leukocitákon hajtottuk végre. Megfigyeltük, hogy a mACHA-k módosítják a HIV koreceptorként működő CXCR4 membrán lokalizációját, és feltehetően ennek hatására gátolják a HIV bejutását a célsejtekbe.
Eredményeinket 2 nemzetközi és 2 hazai konferencián adtuk elő, valamint 2 megjelent nemzetközi (pályázó egyikben megosztott elsőszerzős, másikban utolsó szerzős), 1 hazai közleményben tettük közzé (összesített impaktfaktor: 8,36), illetve 1 közleményt beküldtünk egy rangos nemzetközi folyóirathoz, ahol az jelenleg elbírálás alatt áll.
kutatási eredmények (angolul)
We chose two of our hybridoma clones previously generated against cholesterol, which produced high amount of IgG3 isotype antibodies binding to cholesterol coated plates. After we produced and purified appropriate amount of antibodies, detailed characterization of the two antibodies (AC1 and AC8) was performed. Antibody specificity toward lipids (including steroids) has been tested and precise affinity measurements were also performed. Reaction between lipoproteins and mACHAs has been tested. Binding of mACHA to endothelial cells and leukocytes was assessed. Since mACHAs bound only to the latter, we performed functional assays with leukocytes. Membrane localization of HIV coreceptor CXCR4 was modified by mACHAs and HIV entry could be inhibited by the antibodies.
Our results has been published at 2 international and 2 Hungarian conferences, in 1 Hungarian and 2 international peer reviewed journals (total impact factor: 8.36) and novel results (inhibition of HIV production) has been submitted into a high-ranked international journal.
Zoltán Beck, Andrea Balogh, Andrea Kis, Emese Izsépi, Adrienn Bíró, Glória László, László Cervenak, Károly Liliom, Gábor Mocsár, György Vámosi, George Füst, János Matkó: New cholesterol-specific antibodies remodel the surface of HIV-target cells and inhibit their in vitro virus production, beküldve a J Lipid Research-be 2009-ben, 2009
Oroszlan M, Herczenik E, Rugonfalvi-Kiss S, Roos A, Nauta AJ, Daha MR, Gombos I, Karadi I, Romics L, Prohaszka Z, Fust G, Cervenak L.: Proinflammatory changes in human umbilical cord vein endothelial cells can be induced neither by native nor by modified CRP., Int Immunol. 2006 Jun;18(6):871-8., 2006
Biro A, Cervenak L, Balogh A, Lorincz A, Uray K, Horvath A, Romics L, Matko J, Fust G, Laszlo G.: Novel anti-cholesterol monoclonal immunoglobulin G antibodies as probes and potential modulators of membrane raft-dependent immune functions., J Lipid Res. 2007 Jan;48(1):19-29., 2007
Cervenak László: Az endothel sejtek immunológiai funkciója, Összefoglaló közlemény, Magyar Immunológia, 2007/6:7, 2007
George Füst, Zoltán Beck, Andrea Kis, Adrienn Bíró, Andrea Balogh, Emese Izsepi , Gloria László, László Cervenak, János Matkó: Anti-Cholesterol Antibodies Inhibit HIV-1 Infection In Vitro, Absztrakt#T3-INV-5, 1st International Symposium on Genetic and Immune Correlates of HIV Infection and Vaccine-Induced Immunity, Budapest, 2007
